关于NEPA21的常见问题解答

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Questions Answers
Q1 NEPA21可以用于细菌或酵母的电转化吗? A1 不行,NEPA21是专用于动物细胞或植物原生质体转染的,基于方波波形而设计,电压控制精确且电刺激温和,有利于提高转染效率和细胞存活率。转化细菌和酵母适宜使用基于指数衰减波波形的电穿孔仪,或其它能产生高压脉冲的装置。
Q2 什么是电穿孔脉冲(poring pulse)? A2 电穿孔脉冲是用于使细胞膜或核膜上产生小孔的脉冲电刺激,DNA或RNA等外源基因可以通过小孔进入到细胞内。这是用电穿孔法进行基因导入的基本原理,大部分品牌的电转染仪都设计有这个步骤。NEPA21除可以产生电穿孔脉冲外,还具备很多新功能,请参看Q3, Q4 和Q5
Q3 什么是导入脉冲(transfer pulse)? A3 导入脉冲用于将带负电的核酸分子通过"电泳效应"导入到细胞中,采用低压和长脉冲时间的设计,充分利用"小孔修复"的这段时间,大大增加基因的转染效率。这是NEPA GENE的专利技术。
Q4 为什么要进行基因的反向导入? A4 在体外转染(in vitro)尤其是悬浮状态下转染时,双向的基因导入模式,可以大大提高转染效率;在活体(in vivo)转染时,双向导入模式,可以扩大转染区域。这是NEPA GENE的专利技术。
Q5 为什么设计多次脉冲? A5 多次脉冲可以提高穿孔效率和导入效率,从而提高转染率。由于NEPA21的多次脉冲是采用"电压衰减"的方式进行的,不会给细胞造成额外的损伤。这是NEPA GENE的专利技术,也是NEPA21获得高转染效率和高细胞存活率的重要原因之一。L
Q6 怎样选择in vivo, in ovo, ex vivo实验用的电极? A6 请将你需要做的实验告诉我们,我们会为您推荐合适的电极和提供相关的文献(reference)、实验方案(protocol)供您参考。让华粤成为您的私人实验顾问!
Q7 怎样选择合适的电转杯耗材? A7 一般情况,我们推荐您使用2mm间隔的电转杯,它适用的细胞数量范围最广,也是最多研究者使用的电转杯型号。针对这个型号的电转杯,我们可以提供的实验方案(protocol)共享服务更多、准确性更高。
Q8 NEPA21与其它品牌的电转杯兼容吗?或者,NEPA的电转杯可以用于其它品牌的电转染仪吗? A8 理论上只要大小合适,电转杯是通用的。但不同厂家使用的模具和材料有差异,因此电转杯的电阻会有差别。当您使用其他品牌的电转杯来执行我们为您建议的实验方案(protocol)时,所取得的效果与使用NEPA GENE电转杯的效果可能会有差别。同理,当您将NEPA GENE的电转杯用于其它品牌的仪器时,也需要对电转染的参数进行优化调整。
Q9 NEPA21的转染过程是否别的试剂辅助? A9 不需要,电转染时只需使用您平时培养细胞用的基础培养基(不含血清)。目前只有NEPA21能做到这一点。
Q10 为什么你们不将对应于不同细胞或组织的转染方案(protocol)在网页中列出来? A10 不同的细胞类型所适用的转染程序不一样,即使是名称、来源相同的细胞,在不同实验室的培养环境下,细胞膜对电刺激的反应亦可能不一致。因此,我们不建议死板的将protocol与cell type一一对应。我们会根据您的细胞的具体情况,为您设计一套个性化的转染方案(protocol)。多次实践经验告诉我们,如果仅在网页上给不同细胞罗列一个"标准程序",您在实际使用中很可能得不到网页上所显示的最佳转染效果。
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